ICS 65.150 CCS B 52 DB32 江 苏 省 地 方 标 准 DB32/T 4207—2022 黑斑蛙繁育技术规范 Technical specifications for artificial breeding for Black-spotted Frog 2022 - 01 - 28 发布 江苏省市场监督管理局 2022 - 02 - 28 实施 发 布 DB32/T 4207—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由江苏省农业农村厅提出。 本文件由江苏省渔业产业长江珍稀鱼类标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：江苏中洋集团股份有限公司、南通龙洋水产有限公司、中国水产科学研究院淡水 渔业研究中心、海安市水产技术推广站。 本文件主要起草人：沈李元、涂翰卿、徐钢春、朱新鹏、贾晓颖、邱燕、黄丽萍、李全杰、朱芮雅、 支宇。 I DB32/T 4207—2022 黑斑蛙繁育技术规范 1 范围 本文件规定了黑斑蛙[黑斑侧褶蛙（Pelophylax nigromaculata）]繁殖的术语和定义、环境与设施、 人工繁殖、蝌蚪培育、幼蛙培育、疾病防控。 本文件适用于黑斑蛙的繁育。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 11607 渔业水质标准 GB 13078 饲料卫生标准 NY 884 生物有机肥 农业农村部《水产养殖用药明白纸 2020 年 1 号》 农业农村部《水产养殖用药明白纸 2020 年 2 号》 3 术语和定义 下列术语与定义适用于本文件。 3.1 种蛙 broodstock 性成熟，用于繁殖后代的蛙。 3.2 蝌蚪 tadpole 蛙受精卵孵化后至完全变态前的幼体。 3.3 幼蛙 froglet 蝌蚪变态发育，尾部消失，长成四脚蛙。 3.4 变态期 metamorphosis stage 蝌蚪从开始长出后肢、前肢，到尾突完全消失变成幼蛙的阶段。 1 DB32/T 4207—2022 4 环境与设施 4.1 环境条件 繁育场应距离居民区500 m以上，四周安静，水源充足；进排水方便；水源水质应符合GB 11607规 定。 4.2 繁育设施 4.2.1 阶梯式直沟型蛙池 种蛙池、蝌蚪池、幼蛙池均采用阶梯式直沟型蛙池，宜长20 m、宽10 m，四周池埂高0.2 m～0.3 m， 顶部宽1.0 m。蛙池侧边至中央依次为第一阶梯、第二阶梯及中间水沟。第一阶梯为斜坡式，宽1.5 m， 坡度10°为宜；第二阶梯宽2 m，深0.15 m；中间水沟宽3 m，深0.3 m～0.5 m。四周设置垂直地面的防 逃网或防逃膜，地上高度0.7 m以上，地下深度0.3 m。进水口设置在蛙池一端中间高于池边0.3 m～0.4 m处，排水口设置在进水口对应的另一端蛙池底部中间，进水管直径宜0.2 m～0.3 m，管口加滤袋，网 目40目～60目为宜；排水管直径宜0.2 m～0.4 m，管口加防逃网。 4.2.2 孵化池 2 2 宜为水泥池,面积6 m ～12 m 、池深0.7 m～0.8 m、水深0.4 m～0.6 m，池底设置坡度：进水端高， 排水端低，坡度15°～20°。进水管口高于池顶部0.1 m，直径宜0.1 m～0.2 m，管口加滤袋，网目60 目～80目为宜；排水管直径宜0.2 m～0.3 m，管口加防逃网。 4.2.3 孵化网箱 由木条和绢布构成，以长0.4 m～0.5 m、宽0.3 m～0.4 m、高0.05 m～0.10m为宜，绢布以80目为 宜，可根据孵化池的大小调整孵化网箱的大小和数量。 4.2.4 食台 由木条和网片组成，以长1.0 m～1.2 m、宽0.4 m～0.5 m为宜，网片规格40目为宜，放置种蛙池和 幼蛙池两侧的第一阶梯。 4.2.5 防鸟设施 应架设距离地面2.2 m～2.5 m的防鸟网。 5 人工繁殖 5.1 种蛙选择 经人工选育的健康种蛙，雄蛙2龄～3龄，体重50 g以上；雌蛙2龄～4龄，体重60 g以上。 5.2 种蛙培育 5.2.1 消毒 2 种蛙入池前15 d～20 d，用生石灰按120g/m 的剂量全池泼洒消毒，3 d～5 d后冲洗1次～2次。放 养前用2%～4%食盐溶液对种蛙浸浴3 min～5 min。 2 DB32/T 4207—2022 5.2.2 放养比例 雌、雄比例以2: 1为宜。 5.2.3 强化培育 以投喂蚯蚓、黄粉虫等动物性饵料为主，补充投喂蛋白含量为38%～42%的人工配合饲料，饲料卫生 应符合GB 13078的规定。 5.3 催产 采取人工催产，自然产卵受精，催产时间4月下旬至5月上旬，水温20℃～25℃为宜。每只种蛙一次 性注射催产药液1.0 mL～1.5 mL，按有效成分剂量计，每公斤雌蛙用催产剂绒毛膜促性腺激素（HCG） 2000 IU～5000 IU；或用促黄体释放激素类似物（LRH-A2）50 ug～150 ug；雄蛙用药量为雌蛙用药量 的1/2，混合用药时剂量为单一药物使用剂量的1/2～1/3，效应时间为40 h～60 h。 5.4 产卵孵化 5.4.1 产卵 水温20℃～25℃，人工催产后按雌雄1：1配比，每平方米放养2对～3对。催产40 h～60 h后，种蛙 抱对产卵受精。 5.4.2 收卵 宜在上午8时至9时，下午2时至3时各收卵一次，宜在l h内完成。蛙卵产出l h～2 h内不要搅动， 2 2 产出3 h～4 h后及时用光滑的捞勺捞出，分散卵块，放入孵化网箱，密度1万粒/m ～2万粒/m 。 5.4.3 孵化 5.4.3.2 孵化池消毒 3 3 使用0.5 g/m ～0.8 g/m 的聚维酮碘进行消毒。 5.4.3.3 孵化用水 含盐量不高于2‰，pH 6～8，溶氧量保持在4 mg/L以上，进水口套三层过滤绢网，绢网从内到外分 别为20目、40目、80目。 5.4.3.4 孵化管理 微流水孵化，及时清除死卵。2 d～3 d蝌蚪出膜，及时将蝌蚪带水转移到培育池。 6 蝌蚪培育 6.1 蝌蚪池消毒 3 3 使用10 g/m ～ 20 g/m 的强氯精进行消毒，用药3 d后换水，水位加至第一阶梯。 6.2 生物饵料培养 2 2 放养前10 d向池内泼洒生物有机肥10 g/m ～15 g/m ，肥料符合NY 884规定。引入小球藻藻种，培 养浮游动物密度至5个/mL以上。 3 DB32/T 4207—2022 6.3 放养密度 2 2 300 尾/m ～500 尾/m 为宜。 6.4 投喂管理 早期摄食水体中的浮游生物，10 d后开始投喂蛋白含量42 %的蝌蚪粉料，泡水后全池投喂，每天投 喂2次，日投喂量为蝌蚪体重2%～3%。17 d后粉料加水和成面团进行定点投喂，35 d后开始投喂蛋白含 量 40 %～42 %膨化颗粒料。 6.5 变态期管理 蝌蚪养殖40 d～50 d进入变态期，逐渐长出后肢。60 d～70 d逐渐长出前肢，尾部开始萎缩，此时 将水位降低至恰好漫过第二阶梯。 7 幼蛙培育 7.1 投喂管理 80 %以上的蝌蚪完全变态成幼蛙后，先在食台上投喂黄粉虫等活饵2 d～3 d，再逐渐添加蛋白含量 38 %～40 %的颗粒饲料、减少活饵投喂量，5 d～7 d后完全投喂颗粒饲料。投料量以1 h内摄食完为宜， 根据摄食情况进行适当增减，每天早晚各投喂1次。 7.2 日常管理 每日巡池2次～3次，观察蛙池的水温、水质和光照情况。每7 d～10 d进行食台清污消毒及中间沟 消毒，换水20%～30%，同时使用过硫酸氢钾0.3 mg/L～0.5 mg/L改底解毒。及时捞出病死蛙，进行深埋 等无害化处理。进入养殖场人员应消毒。做好防逃、防敌害等日常管理。当水温超过30℃时，需遮荫， 同时加大换水量或使用地下水降温及补水。做好养殖记录。 8 疾病防控 常见蝌蚪及幼成蛙疾病防治参见附录A。药物使用应符合农业农村部《水产养殖用药明白纸2020年1 号》《水产养殖用药明白纸2020年2号》的规定。 4 DB32/T 4207—2022 AA 附 录 A （资料性附录） 常见黑斑蛙疾病及防治方法 常见黑斑蛙疾病及防治方法见表A.1 表A.1 常见黑斑蛙疾病及防治方法 病名 红腿病 腐皮病 肠胃炎 脑膜炎 肝肿大 病 出血病 发病季节 5月～9月 症状 防治方法 发病个体精神不振、活动能力 减弱，腹部膨胀，口和肛门有 带血的黏液。发病初期后肢趾 尖红肿，有出血点，很快蔓延 到整个后肢。胃肠充血肝、脾、 肾肿大并有出血。 预防时，每10 d〜15 d使用聚维酮碘对养殖水体进行消毒，用 3 3 量为0.5 mL/m 〜1.0 mL/m 水体；按5%投饵率计，每7 d〜10 d 在饲料中添加黄芷多糖2 g/kg饲料、复合维生素3 g/kg饲料， 连用5 d〜7 d，以提高蛙体免疫力。 治疗时，按5%投饵率计，拌料内服10%氟苯尼考粉2 g/kg〜4g/kg 饲料,复合维生素3 g/kg〜5 g/kg饲料,连续使用5 d～7 do外用 3 3 聚维酮碘0.5 mL/m 〜1.0 mL/m 水体。 初期蛙头、背、四肢等处皮肤 预防时，应减少人为干扰，饲料中长期拌加鱼肝油2 g/kg饲料 失去光泽，随后出现白斑、表 和复合维生素3 g/kg饲料。 4 月～6 月、 皮脱落、腐烂，露出红色肌肉， 治疗时，按5%投饵率计，拌料内服10%盐酸多西环素粉4 g/kg 蔓延较快。 〜8 g/kg饲料,双黄连溶液3 g/kg〜5 g/kg饲料,复合维生素3 9月～10月 3 g/kg〜5 g/kg饲料,连续投喂5 d〜7 d；同时外用0.5 mL/m 的 20%戊二醛溶液等消毒，连用3 d〜5 d。 预防时，可长期在饲料中添加EM菌、酵母菌等进行预防，按活 菌数10亿CFU/g计，用量为3 g/kg〜5 g/kg饲料。 4月～10月 病蛙食量明显下降或停止摄 食，在池中瘫软无力，捕起时 缩头弓背，解剖可见胃外表有 树枝状充血，胃粘膜出血，肠 道外表发红，胃肠空。 预防时，养殖过程中应勤换水，合理规划养殖密度；每10 d〜 3 15 d使用聚维酮碘对养殖水体进行消毒，用量为0.5 mL/m 〜1.0 3 mL/m 水体。 7月～10月 病体精神不振，行动迟缓，食 欲减退，发病蝌蚪后肢、腹部 和口周围有明显的出血斑点。 部分蝌蚪腹部膨大，仰浮于水 面打转，有时又恢复正常。解 剖可见腹腔大量积水，肝脏发 黑肿大并有出血斑点，脾