ICS 11.220 CCS B 41 DB63 青 海 省 地 方 标 准 DB 63/T 2001—2021 无规定动物疫病区监测技术规范 2021 - 12 - 25 发布 青海省市场监督管理局 2022 - 02 - 01 实施 发 布 DB63/T 2001—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由青海省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：青海省动物疫病预防控制中心。 本文件起草人：炊文婷、傅义娟、应兰、李秀英、林元清、张燕、张总超、杨启林、孙生祯、李万 顺、张海姐、葛云、铁忠华、李淑玲、白鹏霞。 本文件由青海省农业农村厅监督实施。 I DB63/T 2001—2021 无规定动物疫病区监测技术规范 1 范围 本文件规定了无规定动物疫病区监测的抽样、样品的采集与运送、监测方式、监测方法、监测结果 处理、证明免疫无疫的监测要求、恢复无疫状况的监测要求、监测档案管理等内容。 本文件适用于免疫无口蹄疫区、免疫无小反刍兽疫区、免疫无包虫病区的建设、评估及恢复无疫的 监测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 18935 口蹄疫诊断技术 GB/T 27982 小反刍兽疫诊断技术 GB/T 32948-2016 犬科动物感染细粒棘球绦虫粪抗原的抗体夹心酶联免疫吸附试验检测技术 NY/T 1466-2018 动物棘球蚴病诊断技术 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 无规定动物疫病区（无疫区） 在某一确定区域，在规定期限内没有发生过规定的某一种或几种动物疫病，且在该区域及其边界， 对动物和动物产品的流通实施官方有效控制，并经国家验收合格的区域。根据是否在区域采取免疫措施， 分为免疫无规定疫病区和非免疫无规定疫病区。 3.2 监测 对某疫病的发生、流行、分布及相关因素进行系统的长时间的观察与检测，以把握疫病状况和发展 趋势。 3.3 流行病学单元 1 DB63/T 2001—2021 具有明确的流行病学关联，且暴露某一病原的可能性大致相同的特定动物群。通常情况下是指处于 相同环境下或处于共同管理措施下的一个畜禽群，如同一个圈舍里的动物，同一个村庄的动物群或使用 同一饲养设施的动物群等。 3.4 假定流行率 假定某个特定时间、某特定区域规定动物疫病病例数或发病数与动物群体的平均值之比。分为群间 假定流行率和群内假定流行率。 4 抽样 4.1 抽样原则 4.1.1 抽样点应包括区域内所有自然村、养殖场、屠宰场、市场、无害化处理场、指定动物通道等流 行病学单元。 4.1.2 抽取的样品要涵盖区域内所有易感动物（包括野生易感动物）。根据不同易感动物数量，按疫 病流行程度、风险程度，确定抽样比例和数量。 4.1.3 加大保护区易感动物的抽样数量和频次。 4.2 抽样方法 先抽取流行病学单元，再从抽取的流行病学单元内抽取个体。 4.3 抽样数量 每个流行病学单元易感动物抽样数量应不少于30头（只），不足30头（只）的应全采。也可根据区 域内动物疫病流行病学特点、历史状况和日常监测等信息，确定假定流行率，按照附录A确定抽样数量。 5 样品的采集与运送 5.1 口蹄疫样品采集按照 GB/T 18935 执行。 5.2 小反刍兽疫样品采集按照 GB/T 27982 执行。 5.3 包虫病犬粪样品采集按照 GB/T 32948-2016 中第 7 章执行， 牛羊血清样品及组织样品采集按照 NY/T 1466-2018 中 2.1 执行。 5.4 按照附录 B 做好采样登记。 6 监测方式 6.1 被动监测 6.1.1 任何单位和个人，发现易感动物出现疑似两疫一病的临床症状，或检测出两疫一病的阳性或可 疑结果时，应立即报告当地动物疫病预防控制机构。 6.1.2 动物疫病预防控制机构在接到疫情报告和疫情举报后，应立即开展现场核查、流行病学调查、 抽样和实验室检测工作。 注：口蹄疫、小反刍兽疫、包虫病简称两疫一病。 2 DB63/T 2001—2021 6.2 主动监测 每年开展不少于2次的流行病学调查及监测工作，春季、秋季各一次，不定时的对动物饲养及流通 等环节进行临床巡查和实验室检测工作。 7 监测方法 7.1 口蹄疫 7.1.1 血清学监测 以下情形应进行血清学监测： a) 猪免疫 28 天后，牛羊等其他动物免疫 21 天后评价口蹄疫免疫抗体水平,宜采用液相阻断酶联 免疫吸附试验方法（见 GB/T 18935）进行； b) 初步判断易感动物是否感染口蹄疫病毒，宜采用非结构蛋白酶联免疫吸附试验方法（见 GB/T 18935）进行。 7.1.2 病原学监测 以下情形应进行病原学监测： a) 出现临床疑似病例，需进行确诊的； b) 出现非结构蛋白抗体阳性的，重新采集牛羊 O-P 液、猪扁桃体,宜采用 RT-PCR 或荧光 RT-PCR 方法（见 GB/T 18935）进行。 7.2 小反刍兽疫 7.2.1 血清学监测 免疫后1个月～3个月内评价小反刍兽疫免疫抗体水平，宜采用竞争酶联免疫吸附试验方法。 7.2.2 病原学监测 确诊易感动物是否感染小反刍兽疫，宜采用RT-PCR或荧光RT-PCR方法。 7.3 包虫病 7.3.1 血清学监测 评价羊包虫免疫抗体水平，羔羊二免7天后，或成年羊加强免疫7天后宜采用酶联免疫吸附试验方法。 7.3.2 病原学监测 以下情形应进行病原监测： a) 犬粪棘球绦虫抗原检测； b) 犬粪棘球绦虫抗原检测阳性的，进行犬棘球绦虫感染检测，采用剖检法检查犬小肠内是否有棘 球绦虫； c) 牛羊脏器包囊检查，检查肝、肺等实质性脏器是否有棘球蚴包囊，判为可疑者，通过 PCR 进行 诊断。 8 监测结果处理 3 DB63/T 2001—2021 8.1 免疫抗体水平低下的易感动物强化免疫继续监测，直至免疫抗体达到本文件第 10 章的要求水平。 8.2 扑杀口蹄疫、小反刍兽疫病原阳性畜并做无害化处理。 8.3 犬棘球绦虫阳性，要持续驱虫，直到犬的感染率降到 2%以内。 9 证明免疫无疫的监测要求 9.1 口蹄疫 应对易感动物进行24个月的监测，监测结果符合： a） 24 个月内无口蹄疫临床病例； b） 12 个月内无口蹄疫病毒传播； c） 24 个月内口蹄疫群体免疫抗体合格率 80%以上。 9.2 小反刍兽疫 应对易感动物进行24个月的监测，监测结果符合： a） 24 个月内无小反刍兽疫临床病例，感染或传播； b） 24 个月内小反刍兽疫群体免疫合格率 80%以上。 9.3 包虫病 应对牛、羊、犬进行24个月的监测，监测结果符合： a） 24 个月内 2 岁以内的牛羊包虫病检出率为 0； b） 24 个月内家犬驱虫后棘球绦虫感染率<2%。 10 恢复无疫状况的监测要求 10.1 10.2 10.3 a) b) c) 发生口蹄疫疫情后，参照《无规定动物疫病区管理技术规范》（农医发[2016]45 号）执行。 发生小反刍兽疫疫情后，参照《无规定动物疫病区管理技术规范》（农医发[2016]45 号）执行。 发生包虫病疫情后： 对患病动物脏器无害化处理，扑杀流浪犬； 场地、圈舍消毒、粪污、垫料深埋或焚烧； 家犬驱虫，每月 1 次，6 个月后，按 7.3 要求开展监测，证明无包虫病感染、传播，可申请恢 复免疫无疫状态。 11 监测档案管理 建立免疫无疫区监测档案管理制度，对采样登记表、流转单、检测记录、检测报告、监测工作总结 等材料整理并归档，设专人管理，档案永久保存。 4 DB63/T 2001—2021 AA 附 录 A （规范性） 检出动物疫病所需样本数量（Cannon 和 Roe 二氏，1982） 表A.1给出了不同群体大小、不同假定流行率下的抽样数量。 表A.1 检出动物疫病所需样本量 群体大小 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 120 140 160 180 200 250 300 350 400 450 500 600 700 800 900 1000 1200 1400 1600 1800 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 9000 假定流行率（群间假定流行率或群内假定流行率） 50% 40% 30% 25% 20% 15% 10% 5% 2% 1% 0.5% 0.1% 4 4 4 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 7 8 8 8 8 8 8 8 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 7 9 9 10 10 10 10 10 10 10 10 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 11 8 10 11 12 12 12 13 13 13 13 13 13 13 13 13 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 14 10 12 14 15 16 16 17 17 17 18 18 18 18 18 18 18 18 18 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 19 10 16 19 21 22 23 24 24 25 25 26 26 27 27 27 27 28 28 28 28 28 28 28 28 28 29 29 29 29 29 29 29 29 29 29 29 29 29 10 19 26 31 35 38 40 42 43 45 47 48 49 50 51 53 54 54 55 55 56 56 57 57 57 57 57 58 58 58 58 58 58 59 59 59 59 59 10 20 30 40 48 52 62 68 73 78 86 92 97 101 105 112 117 121 124 127 129 132