ICS 65.020.30 B 44 备案号:36786-2013 北 京 DB11 市 地 方 标 准 DB11/T 961—2013 梅花鹿人工授精技术规程 Code of practice on artificial insemination in the sika deer 2013 - 01 - 31 发布 北京市质量技术监督局 2013 - 05 - 01 实施 发 布 DB11/T 961—2013 目 次 前言................................................................................. II 1 范围............................................................................... 1 2 规范性引用文件..................................................................... 1 3 术语和定义......................................................................... 1 4 人工授精室要求..................................................................... 2 5 适繁母鹿选择....................................................................... 2 6 母鹿发情鉴定....................................................................... 2 7 采精、精液品质检查和冷冻保存 ....................................................... 3 8 输精............................................................................... 3 9 配种产仔记录....................................................................... 4 附录 A（资料性附录） 母鹿配种产仔记录表 .............................................. 5 I DB11/T 961—2013 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由北京市农业局提出。 本标准由北京市农业标准化技术委员会归口。 本标准由北京市农业局组织实施。 本标准起草单位：北京市畜牧兽医总站、中国农业大学。 本标准主要起草人：刘国世、蒋益民、薛水玲、王俊、史文清、赵广华、陈连国、商业、王梁、任 康、杨宇泽。 II DB11/T 961—2013 梅花鹿人工授精技术规程 1 范围 本标准规定了梅花鹿人工授精室要求、适繁母鹿选择、母鹿发情鉴定、采精、精液品质检查和冷冻 保存、输精、配种产仔记录。 本标准适用于梅花鹿人工授精技术操作与管理。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4143 牛冷冻精液 NY/T 1234 牛冷冻精液生产技术规程 DB11/T 421 梅花鹿饲养技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 性成熟 sexual maturity 梅花鹿经过生长发育到一定时期开始表现性行为，出现第二性征，性腺能够产生成熟的、具有受精 能力的生殖细胞。梅花鹿性成熟一般为16月龄～28月龄。 3.2 发情周期 estrous cycle 母畜初情期后，其生殖器官及性行为发生一系列周期性变化（非繁殖季节及母畜怀孕除外），发情 周期的计算是从这次发情之日起至下次发情开始的这一段时间。 3.3 人工授精 artificial insemination 人工方法采集公畜精液，经检查和处理后，再输到发情母畜生殖道内，以代替公母畜自然交配而繁 殖后代的一种繁殖技术。 3.4 电刺激采精 electro-ejaculation 通过电流刺激腰椎有关神经和壶腹部而引起公畜射精的方法。 1 DB11/T 961—2013 4 人工授精室要求 4.1 布局 人工授精操作室包括采精室、精液检查室。采精室要求安静、通风、保温，精液检查室要求洁净、 室温不能低于20℃。 4.2 器械 输精枪、一次性套管、一次性长臂手套、载玻片和盖玻片、显微镜、温度计、大镊子、液氮罐、电 刺激采精器、保温箱、消毒柜。 4.3 药品及试剂 凡士林、75%乙醇、生理盐水。 4.4 稀释液的配制 按NY/T 1234的规定配制稀释液。 4.5 器械的清洗及消毒 4.5.1 器械清洗 先用肥皂液或碳酸氢钠溶液洗涮，除去污垢。最后用生理盐水或者温开水冲净残留的污渍。 4.5.2 消毒 按照器械的种类采用相应的消毒方法。按NY/T 1234的规定进行消毒 。 5 适繁母鹿选择 5.1 梅花鹿育成母鹿不宜进行人工授精。 5.2 经产母鹿可进行人工授精，母鹿应是当年正常产仔且无难产、死胎等产科疾病。 5.3 母鹿保持 8～9 成膘情。 6 母鹿发情鉴定 6.1 母鹿的发情特点 梅花鹿母鹿一般多在9月下旬至11月中旬发情，10月上旬和中旬为发情高峰期。发情周期7d～23d(平 均14.4d)，发情持续时间18h～36h。 6.2 公鹿试情法 6.2.1 试情公鹿的选择 试情公鹿要求在 3～5 岁，性欲强，性情较为温顺，驯化程度较好。 6.2.2 试情公鹿的饲养 按照种公鹿的要求单圈喂养，饲养管理按照DB11/T 421的规定。 2 DB11/T 961—2013 6.2.3 公鹿试情 6.2.3.1 在试情开始时要认真调教。 6.2.3.2 将试情公鹿放入母鹿群中，一般按 1:10～20 准备试情公鹿。每天试情 3～4 次。每次试情 20min～30min。 6.2.4 母鹿发情的判断 母鹿稳定接受公鹿爬跨即为发情。母鹿爬跨其它母鹿或公鹿不能列为正式发情。 6.3 直肠触摸法 6.3.1 直肠触摸法是把手臂伸到母鹿直肠内，隔着肠壁触摸卵巢上的卵泡，感觉其卵泡发育程度，排 卵的变化情况，来判定母鹿发情周期进度。直肠检查与试情相结合，可提高受孕率。 6.3.2 宫角轻轻触摸卵巢，看卵巢是否有卵泡发育。 7 采精、精液品质检查和冷冻保存 7.1 电刺激采精 7.1.1 采精准备 公鹿进行麻醉，剪去包皮周围的被毛，用生理盐水擦净，清除直肠内宿粪。 7.1.2 采精步骤 将电极棒插入到公鹿直肠深20㎝～25㎝，进行由低到高的电压刺激，每次通电5s，断电3s～5s，直 至某一电压时公鹿在通电后开始射精，则不再上升电压，但继续以5s通电、3s～5s断电的方式直至不再 射精为止。 7.2 精液品质检查 9 精子活力和密度的检查按照GB 4143。鲜精要求活力0.60以上,精子密度1.2×10 /mL左右。 7.3 精液冷冻 精液冷冻方法按照NY/T 1234。 7.4 冻精解冻 取冻精，放入38℃±2℃的水浴中解冻8s左右，精液活力大于0.30，每支细管不少于1000万个有效 精子。 8 输精 8.1 输精时间 母鹿发情盛期后应每隔 1h～2h 进行复试，直到母鹿不再接受爬跨时进行 1 次输精。 8.2 细管安装 将解冻后的细管冻精，从棉球封口处一端插入输精枪尖端，剪去细管的多余部分，安上硬外套即可。 3 DB11/T 961—2013 8.3 输精方法 8.3.1 直肠把握输精法 8.3.1.1 直肠把握输精法主要适用于直肠围度在 20cm 以上的体型较大的梅花鹿。 8.3.1.2 母鹿输精前进行麻醉。 8.3.1.3 输精员将母鹿宿粪排出。 8.3.1.4 一手伸入直肠隔着直肠壁找到并握住子宫颈，使子宫颈口握于手心内，另一手持输精枪，从 阴道前庭入口斜向与直肠内壁呈 45 度角缓缓插入，当枪头部位进入后，再将输精枪后端抬起呈平行状 态缓缓插入阴道内，通过双手互相配合使输精枪找到并插入子宫颈口，通过 4 个子宫颈皱褶，将精液注 入子宫体内，然后撤回输精枪。 8.3.1.5 输精时要求轻插、慢注、缓出。 8.3.1.6 输精后静脉注射解麻药。 8.3.2 开膣器输精法 8.3.2.1 开膣器输精法适用于体型小、直肠围度在 20cm 以下梅花鹿。 8.3.2.2 将麻醉后母鹿抬到输精台上，头向下倾斜 30 度角，将开膣器用生理盐水浸湿，徐徐插入阴道， 使前端紧靠子宫颈口处，借助光源，找到子宫颈口。将输精枪插入子宫颈内 2cm～3cm，注入精液，取 出输精枪，注射解麻药。 8.3.3 腹腔内窥镜输精法 8.3.3.1 将麻醉母鹿固定于手术架上。 8.3.3.2 术部备皮消毒。 8.3.3.3 在腹正中线的左侧，用 7mm 的套管和探针打一孔，抽出探针，放入内窥镜管。在腹正中线右 侧相同部位，用手术刀片划入一小口约 1.5cm，插入宫颈钳，借助内窥镜管观察子宫角及卵泡发育情况。 将宫颈钳拔出，插入专用输精枪，将精液输到有成熟卵泡发育一侧的子宫角大弯处。 8.3.3.4 输精后皮肤创口缝合 1 针。 8.3.3.5 肌注 160 万单位青霉素，注射解麻药。 9 配种产仔记录 应对母鹿发情、人工授精、妊娠和产仔进行详细的记录，见附录A。 4 DB11/T 961—2013 AA 附 录 A （资料性附录） 母鹿配种产仔记录表 表A.1 母鹿配种产仔记录表 记录员 母鹿耳号 年龄 品种 历年产仔 特征 药物注射 时间 发 时间 试情公鹿 表现症状 名称 左卵巢 剂量 右卵巢 术者 术者 情 鉴 定 人 时间 工 公鹿 精液 精液 耳号 类别 编号 输精量 精子 输精 活力 方法 术者 授 精 妊 时间 诊断方法 预产期 产仔时间 特征 结论 备注 术者 初生重 术者 娠 诊 断 产 怀孕期 产仔性别 品种 耳号 仔 _________________________________ 5