ICS 65.150 B51 备案号：38080-2013 海 南 DB46 省 地 方 标 准 DB 46/ T 255—2013 马氏珠母贝插核育珠技术规程 Technical regulations for nucleus-inserting and pearl production of pearl oyster Pinctada fuctada martensii (Dunker) 2013 - 07 - 10 发布 海南省质量技术监督局 2013 - 08 - 01 实施 发 布 DB46/ T 255—2013 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由海南省海洋与渔业厅提出。 本标准起草单位：海南大学、海南省海钰珍珠研究院。 本标准起草人：冯永勤、周永灿、谢珍玉、王世锋、方再光。 I DB46/ T 255—2013 马氏珠母贝插核育珠技术规程 1 范围 本标准规定了马氏珠母贝Pinctada fuctada martensii (Dunker)插核育珠技术规程的术语和定义、 术前处理、栓口、细胞小片制作、插核、术后休养和育珠。 本规程适用于马氏珠母贝插核育珠技术操作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY 5052 无公害食品 海水养殖用水水质 DB46/T 13 海水养殖珍珠 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 母贝 壳长3 cm以上尚未进行插核手术的贝的统称。 3.2 小片贝 用于制作外套膜细胞小片的母贝。 3.3 育珠贝 经过人工插核手术，在贝体内已植入珠核及细胞小片后用于培育珍珠的成贝。 3.4 插核 在珍珠贝体内植入珠核及细胞小片的操作过程。 3.5 术前处理 母贝性腺发育初期或生理机能过强时，采取抑制性腺发育和减弱生理机能强度；母贝生殖腺过于饱 满时，采取促进生殖细胞排放等处理措施。 3.6 休养期 母贝插核手术后经过20 d～30 d的休养恢复期。 3.7 育珠期 1 DB46/ T 255—2013 母贝插核手术后，经过休养、珍珠育成至收获的全过程。 3.8 壳长 由贝壳的前端至后端的最大距离。 3.9 壳高 由贝壳顶端至腹缘的最大距离。 3.10 壳宽 左右两壳间的最大距离。 3.11 体重 贝个体的湿重量。 4 术前处理 4.1 抑制性腺发育及生理机能强度的方法 4.1.1 塑料筐吊养处理法 塑料筐为长方形，规格为长40 cm、宽30 cm、高16 cm，四周有长方形的孔，孔长1.5 cm、宽0.8 cm， 每筐装入母贝60～80个，吊养水深3 m～5 m，吊养时间15 d～30 d。 4.1.2 网笼吊养处理法 用网目2 mm的聚乙烯网布缝制成长110 cm、宽60 cm的网袋，在网袋内套入两个直径32 cm的锥形贝 笼，每笼装入母贝40个，吊养水深3 m～5 m，吊养时间7 d～15 d。 4.2 促进生殖细胞排放的方法 按照4.1.1的吊养方法，选择晴天气温较高时将塑料筐提升至水深0.5 m的水层，第二天再将塑料筐 下降至水深3 m～5 m水层，以此方法连续操作3～4次，利用水温变动刺激生殖细胞排放；经检查大部分 生殖细胞已排放之后，将母贝再次深吊于水深5 m水层，吊养3 d～5 d后用于插核施术。 5 栓口 5.1 插核贝的选择 选择1.5～2.5龄母贝，壳高6.5 ㎝、壳宽2.3 ㎝以上，体重大于38 g，贝体健壮，植核部位较大并 疏松。 5.2 清贝 先用清贝刀切断母贝足丝和清除贝壳表面的附着生物，再用海水冲洗贝壳表面的污泥。 5.3 排贝 2 DB46/ T 255—2013 将母贝腹缘向上紧密排列于排贝笼内，为使插核贝之间尽可能没有缝隙，把个别贝腹缘向下倒插于 两贝之间，然后将排贝笼吊养于海区2 h～3 h。 5.4 栓口 将排贝笼中的母贝稍松开，当母贝自然张壳时,用开口器张开贝壳，然后在两壳间塞入宽1.3 cm～ 1.5 cm的木塞，或用开口器张开贝壳后直接放于插核台手术。 6 细胞小片制作 6.1 小片贝的选择 选择1.5龄至2龄、壳长6.5 cm以上、贝体健康、贝壳珍珠层呈银白色、外套膜自然伸展至贝壳边缘、 外套膜厚薄适中的母贝作为制作细胞小片的小片贝。 6.2 切取外套膜 剖开小片贝，用剪刀剪取从唇瓣下方至肛门腹面的外套膜，剪取路线为外套膜肌集束端与色线之间。 然后用小片刀以色线为中间，按内、外各占一半比例把外套膜切成长条形。外套膜边缘触手应切除干净。 6.3 抹片 把切成长条状的外套膜放置于玻璃板或质地坚实的光滑木板上，用湿棉花球抹去外套膜两面的粘 液，在分泌珍珠质的一面（称正面，即自然生长时外套膜紧贴贝壳的一面）应轻抹，避免损伤分泌珍珠 质的组织细胞。 6.4 切小片 用小片刀将经抹片的长条形外套膜切成方形或近方形的小片，小片边长根据拟植入的珠核大小而 定，直径7.5 mm～8.5 mm的珠核，小片边长为2.6 mm～3.0 mm；直径6.5 mm～7.5 mm的珠核，小片边长 为2.3 mm～2.6 mm；直径5.0 mm～6.5 mm的珠核，小片边长为2.0 mm～2.3 mm。 6.5 消毒与染色 使用医用红汞药水配成3％海水溶液，然后滴于小片上染色与消毒。 6.6 小片使用时间 小片制作完成后，应在20 min以内使用完。 7 插核 7.1 切口 将插核贝安放于插核台后，先判别是否适宜进行插核手术。对适宜手术的插核贝，用开口刀在其足 基部黑白处切开一弧形切口，切口宽度以稍小于珠核直径为宜，刀口深度应不伤及足丝腺。 7.2 通道 使用通道针往“左袋”（腹嵴与肠管之间部位）和“右袋”（围心腔与泄殖孔之间部位）进行通道， 通道路径紧靠表皮下面前进，不应伤及肠管和消化肓囊。 3 DB46/ T 255—2013 7.3 插核 7.3.1 核位 核位包括“左袋”和“右袋”，“左袋”位于缩足肌腹面，腹嵴与肠管之间；“右袋”位于围心腔 与泄殖孔之间。 7.3.2 珠核规格 拟植入珠核的规格根据插核贝的壳高来确定，具体见表1： 表1 插核贝的壳高与植入珠核规格 插核贝壳高 cm 植入单核规格 植入双核规格 mm mm 左袋 左袋 右袋 6.5～7.0 6.6～7.2 6.0～6.5 5.0～6.0 7.0～7.5 7.2～7.5 6.5～7.0 6.0～6.5 7.5～8.0 7.5～8.0 7.0～8.0 6.5～7.0 8.0～9.0 8.0～8.5 8.0～8.5 7.0～7.5 7.3.3 送核 先向“左袋”部位送核，用送核器吸住珠核1/3面积部位，沿着通道向“左袋”核位前进，当珠核 到核位时，用送核器向核位轻压珠核，使珠核埋植于核位内，埋植深度以从腹嵴表皮观察珠核不造成表 皮隆起为准。“右袋”部位送核，只用送核器沿通道送至“右袋”核位即可。一个插核贝只植单核部位 为“左袋”，植双核为部位为“左袋”和“右袋”。 7.4 送小片 送小片有“先送小片法”和“后送小片法”两种，“先送小片法”为先送小片后送核; “后送小片 法”为先送核后送小片。“先送小片法”应把分泌珍珠质的细胞面向上，用小片针把小片分别送至左袋 和右袋核位即可；“后送小片法”是将分泌珍珠质的细胞向下，用小片针把小片送至珠核表面后，沿着 珠核把小片移至珠核后端下方，使珠核紧压住小片。 7.5 暂养 完成插核手术后的育珠贝先放于休养笼中，然后放置于插核室水槽中或吊养于插核室附近的贝架上 暂养。 8 术后休养 8.1 休养笼具 休养笼具有锥形休养网笼和方型塑料笼两种，锥形笼底部直径32 cm、高20 cm，网笼底部用网目2 mm 的聚乙烯网布包住，上方为3 cm网目的聚乙烯网；塑料笼规格长40 cm、宽35 cm、高16 cm，其四周有 长方形孔，孔长1.5 cm、宽0.8 cm。 8.2 放养密度 4 DB46/ T 255—2013 锥形休养笼放养手术贝40个；方型塑料休养笼放养手术贝60个。休养贝选择风平浪静、潮流缓慢的 海区吊养，吊养水深3 m～4 m。 8.3 休养期管理 插核手术后第2 d至第7 d，每天检查死亡情况。检查时把贝笼提至表层，如发现死亡个体应尽快捡 出，并清除贝笼中的污物，记录死亡贝数及吐出的珠核数。检查操作过程速度应快、轻，尽量减少对插 核手术贝的刺激。 8.4 贝体康复判定 休养贝体康复时，贝壳腹缘生长出新鳞片，有新的足丝分泌，贝体软体部黑色素恢复到手术前的状 态。 8.5 休养时间 休养时间一般为20 d～30 d。 9 育珠 9.1 育珠海区条件的要求 育珠贝养殖场所应选择风浪比较小，潮流比较畅通的海区，水深5 m以上，底质为沙、砾石或沙泥， 受台风影响较小的海区；且要求养殖海区的海水盐度25～35，冬季水温不低于13 ℃，夏季水温不高于 30 ℃。海水水质应符合NY 5052 的规定。 9.2 育珠贝笼具 聚乙烯锥形网笼，筐底直径32 ㎝、高20 ㎝，网目长度3 ㎝；聚乙烯片状网笼，长70 cm、宽40 cm， 网目4 cm。 9.3 育珠贝放养密度 聚乙烯锥形网笼，每笼放养休养期结束后的育珠贝30个；聚乙烯片状网笼，每笼放养育珠贝40～45 个。 9.4 育珠贝的管理 9.4.1 清贝 根据贝笼附着物情况，每1～4个月换笼和清除育珠贝体表附着物1次。清贝时应避免阳光曝晒及露 空时间过长，清除的附着物不应倒入海中。 9.4.2 调节吊养深度 夏季高温期、暴雨季节和冬季低温期吊养于4 m～5 m水层，温度适宜时，吊养于2 m～3 m的水层。 9.5 育珠期 育珠期12～18个月。 9.6 收珠 5 DB46/ T 255—2013 珠层厚度0.4 mm以上，抽样检查珍珠层形成的厚度符合DB46/T 13的要求后方可收珠。 _________________________________ 6