ICS67.080.20 CCSB31DB36 江西省地方标准化指导性技术文件 DB36/Z001—2022 蔬菜水果中克百威的检测 量子点微球荧光免疫层析法 Determinationofcarbofuraninfruitsandvegetables—— Quantumdotmicrospherelateralflowimmunoassay 2022-12-06发布 2022-12-06实施 江西省市场监督管理局发布 DB36/Z001—2022 I  目次 前言.................................................................................II 1范围...............................................................................1 2规范性引用文件.....................................................................1 3术语和定义.........................................................................1 4原理...............................................................................1 5试剂和材料.........................................................................1 6仪器和设备.........................................................................1 7试样制备...........................................................................2 8检测步骤...........................................................................2 9结果表述............................................................................2 10其他................................................................................2 DB36/Z001—2022 II前  言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由江西省市场监督管理局提出并归口。 本文件起草单位：南昌大学、江西省市场监督管理局、江西省检验检测认证总院、江西维邦生物科 技有限公司。 本文件主要起草人：赖卫华、郭丹、余颐、陈媛、熊勇华、彭娟、张威、郭平、熊华亮、刘文娟、 罗凯、李响敏、黄小林、唐丽君、殷佳琦、薛广健、陈珍珍、汪健健、路芸。 DB36/Z001—2022 1蔬菜水果中克百威的检测量子点微球荧光免疫层析法 1范围 本文件规定了蔬菜水果中克百威的量子点微球荧光免疫层析快速检测方法。 本文件适用于辣椒、青菜、豇豆、芹菜、韭菜、黄瓜、苹果、柑橘和梨中克百威的快速检测。 本方法检测克百威的检出限为0.004mg/kg，定量限为0.008mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB23200.112食品安全国家标准植物源性食品中9种氨基甲酸酯类农药及其代谢物残留量的测 定液相色谱-柱后衍生法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 本方法以量子点微球为荧光标记物，基于竞争抑制免疫层析技术原理，通过荧光免疫分析仪进行数 据读取和分析，根据已设定的标准曲线计算样品中待测物质的含量，对蔬菜水果中的克百威进行定量检 测。 5试剂和材料 除另有说明外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。 5.1乙腈（C2H3N）。 5.2磷酸氢二钾（K2HPO4）。 5.3磷酸二氢钾（KH2PO4）。 5.4试样提取液：准确称取5.6g磷酸氢二钾（5.2）、0.41g磷酸二氢钾（5.3），乙腈（5.1）100mL 用水溶解并定容至1L。 5.5试样稀释液（0.01mol/L磷酸盐缓冲液）：准确称取5.6g磷酸氢二钾（5.2）、0.41g磷酸二氢钾 （5.3），用水溶解并定容至1L。 6仪器和设备 DB36/Z001—2022 26.1分析天平：感量为0.01g。 6.2微量移液器：20µL～200µL、100µL～1000µL和1mL～10mL。 6.3旋涡振荡器：转速≥2500r/min。 6.4恒温孵育器：设定温度为37℃，误差不超过±1℃。 6.5荧光免疫分析仪：激发波长为365nm±5nm，发射波长为610nm±5nm。 6.6离心机：转速≥4000r/min。 6.7均质机：转速≥5000r/min。 6.8离心管：1.5mL和50mL。 6.9克百威量子点微球免疫层析包装盒：含量子点微球免疫层析试纸条和标准曲线内置卡（ID卡）， ID卡内设对应批次标准曲线。 7试样制备 7.1分样和粉碎 取不少于100g具有代表性的蔬菜水果样品，充分均质混匀，均分成两份分别装入洁净容器作为试 样和留样，密封，标记，留样置于-20°C避光保存。蔬菜水果测定部位按照GB2763的规定执行。 7.2试样前处理 7.2.1准确称取2g±0.1g试样于50mL离心管中。 7.2.2向上述离心管中加入试样提取剂3mL（5.4），封盖漩涡混匀2min。 7.2.3取1mL提取后上清液，4000rpm离心2min。 7.2.4取50µL离心后上清液加入700µL克百威试样稀释液（5.5），混匀后用于检测。 注：不同厂家检测卡所用的样品前处理方法可能不同，应按照产品使用说明中规定方法进行操作。 8测定步骤 8.1测试前打开荧光免疫分析仪（6.5），确认包装盒中的ID卡与产品批号是否匹配，插入ID卡，在 仪器测试界面点击“读卡/读项目”，界面出现“读取完成”，点击“确认”即可使用。 8.2将恒温孵育器（6.4）开机，待温度升至37℃即可使用。 8.3从密封包装袋中取出克百威量子点微球免疫层析试纸条，在30min内使用。 8.4将克百威量子点微球免疫层析试纸条平放，用微量移液器吸取90μL稀释后的待测液于克百威量 子点微球免疫层析试纸条的加样孔（S）中，在恒温孵育器中37℃孵育反应10min。 8.5反应时间结束后立即将克百威量子点微球免疫层析试纸条插入荧光免疫分析仪中，点击仪器界面 的“测试”，仪器会自动给出定量测试结果，15min内测试，结果有效。 注：不同厂家荧光免疫分析仪所用仪器界面设置可能不同，应按照仪器使用说明中规定方法进行。 9结果表述 样品中克百威的含量由荧光分析仪自动计算并显示，单位为毫克/千克（mg/kg）。 10其他