ICS 13.020.01 CCS Z 01 DB11 北京市地方标准 DB11/T 2023—2022 鱼类贝类环境 DNA识别技术规范 Technical regulations for fish and shellfish identification using environmental DNA 2022 - 09 - 29发布 2023 - 01 - 01实施 北京市市场监督管理局 发布 DB11/T 2023—2022 I 目 次 前言................................................................................. II 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 鱼类贝类 eDNA识别程序 .............................................................. 2 5 试剂和器具 ......................................................................... 2 6 水样采集 ........................................................................... 4 7 水样富集 ........................................................................... 5 8 DNA提取和纯化 ..................................................................... 5 9 PCR扩增 ........................................................................... 6 10 测序及结果分析 .................................................................... 7 11 质量保证与质量控制 ................................................................ 8 附录A （资料性） 8碱基条形码参考序列 ............................................... 9 参考文献 ............................................................................. 10 DB11/T 2023—2022 II 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第 1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由北京市水务局提出并归口。 本文件由北京市水务局 组织实施。 本文件起草单位：北京市水文总站（北京市水务局水质水 生态监测中心）、中国科学院生态环境研 究中心、首都师范大学。 本文件主要起草人：黄振芳、刘波、杨蓉、李世国、王忠锁、王东霞、徐斌、赵红磊、叶燕慧、郭 伟、徐冉、唐女、孙春媛、张满 富、吕喆、王浩、王玉璠、吴玉梅、王雪莲、刘芳、焦振寰、陶亮、薛 晨旺。 DB11/T 2023—2022 1 鱼类贝类环境 DNA识别技术规范 1 范围 本文件规定了鱼类贝类环境 DNA（eDNA）识别的对象、技术方法、采集和实验分析等技术要求。 本文件适用于河流、湖泊、水库和渠道等地表水域的鱼类和贝类 eDNA识别。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文 件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 SL 219 水环境监测规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 鱼类 fish 以鳃呼吸、凭上下颌摄食并通过尾和躯干摆动以及鳍的协调作用游泳的水生脊椎动物，是软骨 鱼纲 和硬骨鱼纲动物的统称。 3.2 贝类 shellfish 具三胚层、真体腔的软体动物，为底栖动物 中的重要功能类群，主要包括双壳类（如蚌类、贻贝） 和腹足类（如螺类）。 3.3 环境DNA environmental DNA (eDNA) 从生物生活环境中直接提取到的不同物种 DNA的总和，包含动植物脱落的细胞或游离的DNA，可 提供一个环境中生活物种的存在记录。 3.4 聚合酶链式反应 polymerase chain reaction (PCR) 一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术，包括变性、退火、延伸等主要步骤。